AISLAMIENTO Y CULTIVO DE CÉLULAS MADRE MESENQUIMALES PARA UN FUTURO TRATAMIENTO DE LA DIABETES.

AUTORES: MARIA LAURA GIMENO, PABLO ARGIBAY

Antecedentes: La diabetes tipo-1 es una enfermedad autoinmunitaria causada por daño irreversible de las células betapancreáticas productoras de insulina. Las células madre pluripotenciales son capaces de diferenciarse a una variedad de estirpes celulares, incluyendo células endocrinas pancreáticas.

Objetivo: Obtención y cultivo de células madre mesenquimales de médula ósea de ratón para uso futuro en protocolos de diferenciación hacia células productoras de insulina.

Lugar de aplicación: Laboratorio de investigación inserto en hospital universitario.

Diseño: Descriptivo, experimental básico.

Población: Ratones C57BL/6 machos de 6-8 semanas de edad con control genético y sanitario.

Método: En condiciones asépticas se obtuvo médula ósea por punción aspiración del fémur. El aspirado se resuspendió en medio de cultivo IMDM completo (20% suero fetal bovino, 0,1% epidermal growth factor y 1% antibióticos). Las células madre se obtuvieron por centrifugación y se sembraron en frascos de cultivo. Después de incubarlas por 24 horas ( 37°C , 5% CO2), se removieron las células no adherentes renovando el medio. Las células primarias proliferaron hasta una confluencia del 80-100%, haciéndose 5-6 repiques hasta obtener sólo células troncales mesenquimales, que se caracterizaron mediante marcación con anticuerpos anti-CDw90 y anti-CD45 bajo microscopio de fluorescencia.

Resultados: Las células madre mesenquimales se observaron a partir del repique 5, con marcas positivas para CDw90 (células mesenquimales) y negativo para CD45 (hematopoyéticas), corroborándose la presencia de células pluripotenciales.

Conclusiones: La aplicación de protocolos de laboratorio permite obtener células madre con capacidad de diferenciación pluripotencial. Su posterior diferenciación hacia tipos celulares específicos podría contribuir al tratamiento de diversas enfermedades, incluyendo la diabetes.